背景簡介:
ELISA實驗廣泛應用于抗體檢測沒有考慮樣本中蛋白與ELISA板表面結合引起的假陽性。在這些非一特性反應中,檢測抗體的空白值被所有客戶考慮到,但是樣本本身的空白值常備客戶忽略。背景反應引起的完全依賴于樣本本身。如果不考慮樣本的背景反應,背景反應值也會計入讀數,出現很多不確定的結果。因此必須認識到ELISA實驗中各種假陽性以得到真實的數據。
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ChondrexTM ELISA 封閉液

發布者:博蕾德 發布時間:2019-10-17 分享到:

簡介:
Chondrex ELISA封閉/稀釋液(ChonBlockTM Blocking/Sample Dilution Buffer)可以同時用作ELISA檢測封閉液,封閉非特異性結合位點,降低背景干擾,同時可用作樣本稀釋液。
特點:
應用于各種抗體檢測試劑盒研發中,使用方便,既可作為ELISA封閉液使用,也可作為樣本稀釋液。

應用:
用于ELISA試劑盒研發,特別適用于工業客戶ELISA檢測試劑盒研發
保存:
-20℃ 保存
操作流程:

  1. 包被抗原:用PBS(含0.05% 疊氮鈉)將抗原稀釋到5-10ug/ml。加入100ul 抗原到ELISA板,4度孵育過夜。用不含內毒素的雙蒸水洗板三次。倒置板倒掉孔內液體,用吸水紙拍干。不要讓孔干燥。
  2. 加入封閉液:加入100ul 封閉液/稀釋液ChonBlockTM Blocking/Sample Dilution Buffer)到各孔,室溫孵育1小時。
  3. 樣本稀釋液制備:1:100稀釋,取10ul血清加入990ul 封閉液/樣本稀釋液(ChonBlockTM Blocking/Sample Dilution Buffer),作為儲液用于后續稀釋。后續依據檢測的抗體水平,做相應的稀釋。例如:取200ul 儲液加入200ul封閉液/稀釋液,對樣本做1:200稀釋。
  4. 洗滌:用洗液(含0.05% Tween 20的PBS)洗版3次。倒置板倒掉孔內液體,用吸水紙拍干。不要讓孔干燥。
  5. 加入樣本:用封閉液/樣本稀釋液ChonBlockTM Blocking/Sample Dilution Buffer)到空白對照孔。加入稀釋后的樣本。
  6. 洗滌:用洗液(含0.05% Tween 20的PBS)洗版3次。倒置板倒掉孔內液體,用吸水紙拍干。不要讓孔干燥。
  7. 加入檢測抗體:用封閉液/樣本稀釋液ChonBlockTM Blocking/Sample Dilution Buffer)稀釋檢測抗體。加入100ul檢測抗體到微孔板,室溫孵育1小時。注意:Chondrex 建議做預實驗,用陽性對照樣本優化做檢測抗體濃度的優化。
  8. 洗滌:用洗液(含0.05% Tween 20的PBS)洗版3次。倒置板倒掉孔內液體,用吸水紙拍干。不要讓孔干燥。
  9. 終止:加入50ul  2N硫酸(終止液)到各孔。
  10. 讀板:讀取OD值
產品訂購:
品牌 貨號 名稱 規格
Chondrex 9068 ChonBlock Blocking/Sample Dilution ELISA Buffer 100ml
Chondrex 90681 ChonBlock Detection Antibody Dilution Buffer 100ml

 

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